El tomate de árbol (Cyphomandra betacea) es un frutal de importancia comercial en países como Bolivia, Colombia, Ecuador y Perú, donde se consu-me como fruta fresca y procesada. Tradicionalmente, es propagado por semillas y estacas, y enfrenta problemas de heterogeneidad y calidad de material de siembra. En esta investigación se desarrolló un protocolo para la micropropagación in vitro del tomate de árbol criollo del fenotipo naranja, proveniente de Costa Rica, el cual presenta potencial para la diversi-ficación agrícola y la agroindustria. Se evaluaron dos tratamientos de desinfección in vitro con variaciones en la concentración del Ca(ClO)2 2,5% y 5,0% (i.a 75%), tres tratamientos para la multiplicación in vitro del material con diferentes reguladores de crecimiento y concentración de sales MS (1962), y seis tratamientos para el enraizamiento in vitro con diversos reguladores de crecimiento y gelificantes. Se determinó que la desinfección con 2,5% de Ca(ClO)2 fue la mejor para el establecimiento in vitro; el mejor medio de cultivo para la micropro-pagación del material fue el M1, compuesto por sales MS(1962) al 100%, sacarosa al 3%, phytagel®1,8g/L, 0,5mg/L de AG3, 0,25mg/L de BAP y 2,0 mg/L de PaCa, el cual presentó el mejor balance entre el número promedio de brotación/explante y el número promedio de entrenudos/explante, sin formación excesiva de callo, mientras que el medio de cultivo E5, constituido por sales MS(1962) al 100%, agar 6,0g/L y sacarosa al 3%, sin reguladores del crecimiento y el medio de cultivo E6, que incluía las sales MS(1962) al 100%, agar 8,0g/L y sacarosa al 3%, sin reguladores del crecimiento, mostraron el periodo más corto para la formación de raíces, el mayor número promedio de raíces y la mayor lon-gitud promedio de raíz y tallo.
